ibidi流体剪切力实验|通道载玻片串连方法步骤

　　ibidi流体剪切力实验应用逐步说明了如何串联连接多个Luer-Slides。优点是仅使用一个流体单元即可观察和培养多个载玻片。当使用相同规格的载玻片时，载玻片中的流速是相同的。也可以通过连接不同高度的载玻片来改变剪切速率。

　　本次介绍了两个载玻片连接的过程。但是它可以应用于大量的载玻片。

　　将一个塑料连接器插入通道载玻片的两端（6厘米），以在载玻片之间连接起来。下图是在两端带有两个配套的Luer公接头的连接器管。可用乙醇或高压灭菌消毒接头。

　　*必须在无菌条件下执行以下步骤！

　　3. 播种细胞　　

　　· 准备1.67 · 106 cells/ml.的细胞悬液。　　

　　· 将150 µl注入通道。仅填充通道体积（图1a）。　　

　　· 将帽盖在Luer接头上，并将载玻片放在培养箱中培养半小时来固定细胞。　　

　　· 细胞固定后，将两边储液接口各加60 µl充满。

　　4. 连接载玻片　　

　　现在准备载玻片，使细胞在通道中生长，并向储液池中填充60 µl无细胞培养基（请参见第3节）。　　

　　· 在连接之前，将所有储液器各加60 µl（图1b）。　　

　　· 将连接器管的一个Luer适配器插入载玻片的一个母Luer适配器中（图1c）。　　

　　· 将一些预备的培养基吸入注射器。倒转注射器并将多余的空气推出（图1d）。　　

　　· 使用没有气泡的注射器在载玻片端口注入。可能会有些溢出（图1e）。　　

　　小心地将液体注入载玻片，直到连接器管中充满为止（图1f）

　　图1：（a）接种细胞时的用量； （b）载玻片在连接之前已*填满； （c）载玻片中插入连接管； （d）无气泡的注射器； （e）将注射器插入载玻片一端； （f）用注射器推动介质来填充连接器管道　

　　· 当连接器管道*充满时（图2a），将其插入第二张载玻片的接口上（图2b-d）。　　

　　· 如果要连接两个以上的载玻片，将第二个连接器管放在第二个载玻片空的另一端口上，用注射器推入介质，依此类推。　　

　　· 慢慢连接的所有载玻片将注射器从适配器上卸下（图2e）。　　

　　· 要将载玻片连接到灌注套件，两个Luer容器必须在顶部填充培养基。可用纸巾擦去过多的培养基。　

　　图2：（a）连接管已*充满； （b-c）将连接器管插入第二载玻片的鲁尔接头上； （d）带有适配接头管连接； （e）取下注射器； （f）擦去溢出的介质，并填充储液罐以连接到灌注套件。

　　5. 连接到灌注装置　　

　　将载玻片连接到灌注套件

　　图片串联安装带有两个µ-Slides I Luer的一个流体单元。