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全自动样品快速研磨仪对水稻叶片的前处理实验研磨操作

更新时间:2023-01-04   更新时间:2023-01-04   点击次数:793次

  摘要:全自动样品快速研磨仪对水稻研磨叶片研磨实验主要目的是满足分子标记辅助育种中基因型鉴定、基因克隆、测序的需要,本研究借用棉签等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2种DNA提取液中操作,建立了一种简单、快速、环保的水稻叶片DNA提取方法。结果表明,提取溶液通过PCR扩增,满足基因扩增对模板的要求。

  

  同时,对其进行了灵敏度测试,稀释107倍仍然能够扩增出目标片段;最后通过PCR、克隆载体连接等分子生物学手段,验证此方法也满足测序的需要。本方法能够在90s内完成植物叶片DNA的提取,解决了目前植物基因组DNA提取方法需要离心机等昂贵特殊设备、提取步骤繁锁、提取过程中刺激味大、提取时间长等问题,有利于大规模开展分子标记辅助育种中材料基因型的鉴定,具有简单、快速、廉价、环保等优点。

  

  实验目的:拟测试全自动样品快速研磨仪对水稻叶片的前处理研磨效果

  

  1.测试对象:上海净信全自动样品快速研磨仪,型号为JXFSTPRP-24L

  

  2.工作原理:样品(水稻叶片)放入离心管中,放入研磨球,通过研磨仪的高速上下振荡带动研磨珠进行粉碎样品。

  

  3.实验器材:上海净信全自动组织研磨仪主机,水稻叶片若干,离心管和不锈钢研磨珠两颗,提取试剂


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  水稻叶片样品前处理研磨实验操作步骤:

  

  一、需要根据样品量及样品实验研磨需求,去对组织研磨仪设备的程序参数的研磨频率及研磨时间进行设置

  

  二、需要把水稻叶片剪成小段后,再放入净信离心管中,再在离心管内加入适量的氧化锆珠和相应提取试剂

  

  三、再把离心管放入机器的适配器中,但需要注意对适配器的配平和紧固,再锁盖


  四、启动设备,即可开始程序的运转研磨


  五、待程设备程序停止运转后,即可完成样品粉碎,便可获得磨后的样品效果

  

  水稻叶片样品前处理研磨实验效果:

  

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  研磨前后效果图

  

  注:全自动样品快速研磨仪在针对样品叶片的研磨时,需要尽可能的添加提取试剂,让样品在实验研磨过程中有液体的情况下,可使样品研磨效果会更加的充分。