产品中心PRODUCTS CENTER
技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 全自动组织研磨机破碎酵母细胞实验-上海净信

全自动组织研磨机破碎酵母细胞实验-上海净信

更新时间:2017-07-20   更新时间:2017-07-20   点击次数:1681次

实验地点:中科院生物物理所生物大分子国家重点实验室

用户:常文瑞组



 

实验方法

1、破碎前的准备:

   0.1g菌体(本实验以0.1g菌体为例);

   直径3号陶瓷珠;

   研磨机(选用品牌上海净信科技TS-24);

   预处理好的2ML研磨管;

   模块冷冻。
 

2、研磨: 

   0.1g菌体,5000r/min离心1 min后去上清,加入等体积的玻璃珠,加入0.5ML PBS溶液,放入预先冷冻好的模块中,放入上海净信科技的研磨机中,调整频率为60Hz,震荡时间60s.

  注:破菌效率随着液体体积的增加而增加,液体体积达到100ul时开始达到大破菌效率。

  附:陶瓷珠回收,以下是方法:

      1、将含陶瓷珠的EP管,放置在大烧杯中,用自来水中浸泡2-3天。

      2、用镊子将陶瓷珠和细胞碎片等全部抖落到烧杯中。静置待玻璃珠沉淀后,轻轻将上面悬浮的细胞碎片倒掉,在加水重悬陶瓷珠。

      3、重复步骤2,4-5次直到所有的细胞碎片都去除干净。

      4、加入适量的浓硝酸(将陶瓷珠全部覆盖即可),浸泡过夜。

      5、去离子水洗三次,置烘箱中干燥即可。