Tissuelyser-48拟南芥或水稻穗RNA快速提取步骤两种方法

更新时间：2012-10-11 更新时间：2012-10-11 点击次数：2646次

*种湿磨法

1.取打碎机适配器于-80°冷冻约15min。
2.取一指节长度的花序，好带上一片叶子，（材料量可多可少，7d大小的苗地上部分也能提出RNA），放入国产2ml EP管中，加一粒钢珠，液氮速冻。之后用镊子取出，快速加入适配器中。（好用国产的EP管即可，进口的管子液氮冻过后，容易裂）
3.打碎15s，50HZ。（水稻嫩叶为。45S，60HZ 老叶为，70S 60HZ）
4.将材料再次放入液氮中。
5.用磁铁吸出钢珠，加入1ml Trizol，余下步骤即正常的RNA提取步骤。

第二种干磨法

1.取一指节长度的花序（材料量可多可少，7d大小的苗地上部分也能提出RNA），放入国产2ml EP管中，加一粒钢珠，400ul Trizol。
2.打碎1min 50HZ （水稻嫩叶为。45S，60HZ 老叶为，70S 60HZ）。
3.吸出钢珠，补600ul Trizol。
4.余下步骤即正常的RNA提取步骤。
注意：钢珠遇到Trizol 会被溶解一部分，所以之后的提取液是黄色的（有铁离子），不必在意，之后异丙醇那一步铁离子会和上清一起别弃掉。

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*种 湿磨法

第二种 干磨法

*种湿磨法

第二种干磨法