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高通量破碎动植物组织和微生物

更新时间:2015-05-26   更新时间:2015-05-26   点击次数:3041次

       破碎大量样品、低温破碎大量样品、破碎坚硬或韧性较强的样品时,人工手动研磨就成了实验猿的噩梦。当然,也有很多实验猿已经尝试过市面一些研磨机/超声波粉碎机,发现自己那顽固的样品依然无法被破碎/破碎过程损坏了目标成分而十分心塞。

       分享个高通量破碎动植物组织和微生物的方法,别逗,当然不是靠徒手研磨能做到的,必须入手个神器——上海净信的tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多样品组织研磨机。对于动植物组织和微生物,包括一些难以破碎的组织样品,都可以使用这个研磨机对其进行粉碎。

    特别地,一些尤其坚硬/韧性比较强的样品,或要求维持低温条件进行破碎提取的样品,需要结合液氮进行研磨,如:皮肤、硬骨骼、软骨、血管、结缔组织、种子等;使用普通机械研磨方法,很难既保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态,尤其是提取RNA、酶等对温度敏感的物质时,低温状态的控制显得尤为关键。入手一台上海净信的多样品组织研磨机,这些都不再是问题了。看招:

注:由于样品的具体差异及实验要求的不同,下文数据部分请咨询厂家。

*部分 破碎动物组织

1)样品:猪肌肉组织

2)仪器: Tissuelyser多样品组织研磨机(品牌:上海净信);

耗材:***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠

3)步骤:

a.取***克左右肌肉组织样品,均匀地剪切成少量样品块,分别放入若干***毫升的研磨离心管中。

b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠和800μL PBS裂解液,分别盖紧管盖后,置入24孔研磨适配器中,再将适配器固定在研磨机中。

c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹,研磨***秒,启动研磨器。

d.研磨停止后,拿出研磨离心管,旋开管盖,取出研磨好的肌肉组织样品。

4)结果:

研磨后的效果如图1,猪肌肉组织成很细腻的泥浆状,说明Tissuelyser多样品组织研磨机对猪肉组织的研磨效果良好。


图1 猪肌肉研磨对比

第二部分 破碎植物组织

1)样品:水稻叶片

2)仪器: Tissuelyser多样品组织研磨机(品牌:上海净信);

耗材:***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠

3)步骤:

a.取***克左右叶片组织样品,均匀地剪切成少量样品块,分别放入若干***毫升的研磨离心管中。

b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠,分别盖紧管盖后,置入24孔研磨适配器中,再将适配器固定在研磨机中。

c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹,研磨***秒,启动研磨器。

d.研磨停止后,拿出研磨离心管,旋开管盖,取出研磨好的叶片组织样品。

4)结果:

研磨后的效果如图2,叶片组织成很细腻的泥浆状,说明Tissuelyser多样品组织研磨机对叶片组织的研磨效果良好。顺带附上研磨黄豆(坚硬的植物种子)的研磨对比图。


图2 水稻叶片研磨对比


图3 黄豆研磨对比

第三部分 结合液氮使用净信tissuelyser研磨机

    当样品死活无法破碎/样品傲娇要低温环境时,上海净信Tissuelyser多样品组织研磨机+液氮=问题轻松解决。以血管和植物叶片为例,具体操作方法如下:

 血管:

    取0.1克新鲜血管,用剪刀剪成若干小块,然后放入2毫升离心管中,加入1颗6mm研磨钢珠,盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾,然后放入机器处理30秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末,然后加入提取缓冲液,可以进行接下来的后续提取,加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。

 叶片:

    取0.2克植物叶片,清洁叶片表面后放入离心管中,加入1颗直径5mm不锈钢研磨钢珠,盖上管盖。将整个试管和适配器放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾,然后取出放入研磨机器中机器处理30秒钟。取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末,然后加入提取缓冲液,进行接下来的后续提取即可,加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。


后记

       想入手这个神器,但又对研磨效果有所犹疑的小伙伴,现在上海净信部分研磨机产品可申请试用,是时候下手了。激动人心的还有,近期研磨机好价,试用爽了直接入手一台也是毫不含糊的。详情可致电或,亦可浏览http://www.tissuelyser。。com/了解更多。