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ibidi µ-Slide 15 Well 3D载玻片在实验中的广泛应用

更新时间:2023-06-12   更新时间:2023-06-12   点击次数:843次

  ibidi μ-Slide 15 Well 3D载玻片不是仅仅可限于血管生成和管形成的分析的应用,还可以用于更多实验的应用。

  

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  μ-Slide 15 Well 3D 的应用原理:

  

  μ-Slide 15 Well 3D 具有专门的设计规格形状,可轻松、方便且可重复地进行管形成分析。它也是发芽测定、免疫荧光染色和一般 3D 细胞培养的理想选择。3D载玻片具有 15 个孔,专为低通量测定而设计。对于大规模应用,ibidi 提供 μ-Plate 96 Well 3D。

  

  在将凝胶加入内孔并给予时间凝固后,可以将细胞接种在其顶部以进行管形成分析。由于采用了“孔中孔"技术,所需的凝胶量减少到每孔仅 10 μl,是常规多孔板用量的 10%。

  

  此外,没有形成凝胶弯液面。这确保了所有细胞都在一个光学平面上的均匀厚凝胶基质的形成,创造了可重复的细胞培养条件。μ-Slide 15 Well 3D 可与所有常见的水凝胶基质一起使用,例如 Matrigel®、胶原凝胶、琼脂糖凝胶和透明质酸凝胶。


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图片中μ-Slide 15 Well 3D采用了“孔中孔"嵌套式技术,每孔仅 10 μl凝胶,没有形成凝胶弯液面

  

  μ-Slide 15 Well 3D载玻片的应用广泛:

  

  1、管形成试验或血管生成试验:

  

  对于管形成测定 (也称为血管生成测定),将内皮细胞接种在 10 μl 凝胶层(基底膜样表面)的顶部,在那里它们形成毛细管样结构。通常使用Matrigel® 。细胞的管形成能力可用于分析各种药物的促血管生成或抗血管生成潜力。

  

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  2、3D 细胞培养:

  

  在许多情况下,3D 环境比 2D 细胞培养更接近于体内情况。μ-Slide 15 Well 3D 是一种简单且经济高效的解决方案,用于培养和显微镜检查嵌入凝胶基质中的细胞。凝胶层直接连接到上面的介质储存器,可以通过扩散快速轻松地进行介质交换。

  

  除了只有一种细胞类型的培养物外,还可以在共培养实验中研究不同细胞类型(例如癌细胞和成纤维细胞)的侵袭行为。

  

  或者,可以使用相同或不同的 3D 凝胶基质(例如基质胶或胶原蛋白)创建夹心培养物。

  

  此外,可以固定非粘附细胞,如血细胞或细菌,以增强显微镜检查。


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  3、免疫荧光染色:

  

  为了分析管形成或 3D 培养实验的结果,可以在 μ-Slide 15 Well 3D 中进行免疫荧光染色。细胞可以直接在凝胶上或凝胶中固定和染色,然后使用高分辨率显微镜成像。

  

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  在 ibidi μ-Slide 15 Well 3D 中培养的成纤维细胞的迁移测定。左侧的细胞分裂并聚合肌动蛋白(绿色)以形成指示迁移方向的前沿。EdU 表示增殖细胞(红色)。细胞核被 DAPI(蓝色)染色。该图像是使用配备 Airyscan 检测器的 Zeiss LSM 880 共聚焦显微镜获取的。图片由意大利的里雅斯特国际基因工程和生物技术中心 (ICGEB) 心血管生物学组的 Ambra Cappelletto 和 Andrea Colliva 提供。

  

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  小鼠胚胎背根神经节,在 ibidi µ-Slide 15 Well 3D 中培养,针对 β III 微管蛋白染色。使用配备 IN Cell Investigator 软件(GE Healthcare,英国)的 IN Cell Analyzer 2000 在 i3S BioSciences Screening Unit 获得的图像。图片由 Estrella Do Céu Neto 提供,i3S - Instituto de Investigação e Inovação em Saúde / INEB-Instituto de Engenharia Biomédica,波尔图大学,波尔图,葡萄牙。

  

  4、Focusing Cells聚焦细胞

  

  当使用少于10μl的凝胶填充μ-Slide 15 well 3D的内孔时,可以培养少量细胞并将其聚焦在柔软的凝胶表面上。


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  5、Low Volume Microscopy Chamber低容量腔室显微镜检

  

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  μ-Slide 15 Well 3D也可以用作不含任何凝胶的腔室显微镜检,这对于需要几个微体积孔的实验非常实用。